驅蚊香草的莖尖培養與快速繁殖 |
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來源: 作者: 發布時間:2013-07-27 12:04 |
驅蚊香草是天竺葵科天竺葵屬多年生常綠草本轉基因植物。它不僅能天然揮發出香茅醛、香茅醇等物質有效驅除蚊蟲,還能散發出檸檬香氣凈化空氣,其主莖柔軟,可以塑造各種盆景供觀賞。驅蚊香草能正常開花,但不能自然繁育。在實踐中證明扦插成活率低,并且其功能逐代衰退。采用莖尖離體培養技術能有效地保持驅蚊香草種性穩定并能快速增加幼苗數量,具有成本低、時間短、繁殖系數高等優點。 (一)材料和培養條件 1.材料:驅蚊香草莖尖。 2.培養條件:MS為基本培養基。(1)起始和增殖培養基:MS+硝酸銨800mg/L(單位下同)+磷酸二氫鈉,H2O150+赤霉素1+KT8+IAA1;(2)生根培養基:1/2MS+Fe鹽5ml+NAA0.2;培養基均加蔗糖3%、瓊脂0.6%,pH5.6,121℃、0.11MPa下滅菌25分鐘。培養溫度25(±1)℃,光照12小時/日,光照度2000Lx。 (二)生長與分化情況 1.無菌材料的獲得:選取健壯的驅蚊香草幼苗,去掉莖尖,移植到經消毒的盆土中室內培養。15~20天后,取腋芽上長約1.0cm的新生莖尖為外植體。去掉展開幼葉,流水沖洗1~2小時,置超凈臺上用70%酒精處理10~15秒,無菌水沖洗2~3次,0.1%高汞鹽消毒10分鐘,無菌水再次沖洗4~5次。無菌條件下用無菌濾紙將材料表面水分吸干,在雙筒解剖鏡下剝取莖尖,將具有2個最幼小葉原基的莖尖接種于起始培養基上。若出現褐化及時轉接,轉接2~3次即不再有褐化。接種5~7天后莖尖萌發生長,15天左右可長到高0.5~2cm、帶1~2片葉的叢生芽,25天后繼代轉移進行腋芽增殖。 苗木網,www.cqhuayin.com 2.腋芽增殖:將上述叢生芽剪切成帶1~2個芽的芽塊,去掉基部愈傷組織后,接種到增殖培養基上。培養30天左右,每個芽塊的腋芽又萌發成長3cm左右,具4~6片葉的叢生芽。這樣重復繼代增殖,每個初始培養的叢生芽繁殖15代左右,即可得到大量組培苗。 3.生根與煉苗:無菌條件下切取叢芽中高3cm左右的壯芽轉接至生根培養基上,培養20天后不定根開始大量形成,每株平均生根8條以上,生根率達95%以上。為讓試管苗逐漸由異養生長向自養生長過渡,打開瓶口倒入20℃溫水至1.5cm左右深保濕防污,煉苗4~6天后小心取出,洗凈根部瓊脂進行移栽。 4.移栽:移栽前將草炭土和珍珠巖按2∶1混合并進行滅菌處理,選擇氣候溫和的時間移栽入混合基質。移栽時用生根粉ABT150mg/L+細土100g/L的溶液浸漬20分鐘。緩苗后定期追施1/2MS大量元素的水溶液,注意溫度、濕度、光照及水肥管理,移栽成活率可達90%以上。 (記者 佚名) 999苗木網,www.cqhuayin.com
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