蝴蝶蘭的組織培養

蝴蝶蘭屬蘭科蝴蝶蘭屬植物，其花形狀奇異清秀，花大艷麗，具有極高的觀賞價值和經濟價值。隨著人們生活水平的不斷提高，蝴蝶蘭的市場需求量也越來越大，但蝴蝶蘭為典型的單莖性熱帶附生蘭，植物很少發生側枝，分株繁殖系數極低。其種子沒有胚乳，自然條件下很難萌發，通過自身的營養繁殖和種子繁殖均不能滿足工廠化育苗的要求。應用植物組織培養技術進行蝴蝶蘭的快速繁殖可以縮短育苗周期，在短時間內獲得大量成株。我們對蝴蝶蘭花梗芽組織培養技術進行研究，取得了很好的效果，為工廠化育苗提供了可能。

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外植體的選擇和消毒 苗木網,www.cqhuayin.com

取蝴蝶蘭花梗在自來水下用細軟毛刷輕刷表面，并吸干表面水分，剪成2一3cm長的莖段。在工作臺上按以下程序進行滅菌處理：將材料放入經高溫滅菌過的燒杯中;加入70%的酒精浸泡20秒;0.1%的HgCl消毒8分鐘，分2次進行，每次4分鐘，滅菌后用無菌水沖洗5次，每次2分鐘;用解剖刀切除壞死部分后，接入培養基。用此方法既能有效地消毒又不會對培養材料產生毒害，培養材料接入培養基后無褐化壞死現象出現。

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無菌材料的試管培養

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培養材料的選擇是蝴蝶蘭組培決繁的關鍵。腋芽節位以下第3、4節花梗芽是最適宜的外植體，而谷朧甘肽200mg/L既能很好地抑制褐化，又能促進試管苗的生長和分化，是蝴蝶蘭組織培養中最合適的褐化抑制劑。B5+GA32.0mg/L+NAAO.lmg/L是較適宜的愈傷組織誘導培養基，B5+6BA1.0mg/L+NAAO.2mg/L是較適宜的分化培養基，1/2MS+IBA1.2mg/L+NAA0.05mg/L及2%蔗糖是較適宜的生根培養基。

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將消毒后的無菌培養材料接種在愈傷組織誘導培養基上，其培養基為B5+GA32.0mg/L+NAAO.lmg/L，培養基pH調至5.8，培養室溫度控制在24士2℃。接種后遮光放置4一5天，而后每天光照12小時，2周后，切口處開始膨大，產生淡綠色瘤狀愈傷組織，并不斷增大。4周后將愈傷組織切下轉接到分化培養基B5+6BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L上，轉瓶后愈傷組織的體積和重量成指數級增加，4周左右愈傷組織表面出現較大綠色顆粒，并形成芽點，繼而分化出叢生芽。分化時出現褐化現象，可加入20omg幾谷朧甘膚解除。當叢生苗長到3一4cm、具有4一5片葉時，將其移到生根培養基1/2Ms+IBA1.2mg/L十NAAO.05mg/L2%蔗糖上，10天后切口基部開始出現白色的根狀突起，25天后，每株生根4條以上，生根率為95%以上。

試管苗的煉苗移栽

試管苗移栽前需要有煉苗的過程，移栽前5天左右，在室內將封口膜打開1/3左右，使幼苗與空氣有一定接觸。2天后，移栽到馴化溫室內，使幼苗完全暴露在空氣中，要適當遮陽，避免高溫和強光直接照射，3天后即可移栽。移栽時將幼苗取出，放在1000倍的多菌靈水溶液中小心洗去根部的培養基，去掉老葉，放入鋪有濕報紙的盒子，要注意保濕。栽培基質為經過高溫消毒后的苔鮮，用鑷子劃痕后，夾住幼苗根部，插入至第1輪葉，用手小心壓緊，用薄膜覆蓋，保持溫度在21一25℃，相對濕度60%一80%，控制好水分和溫度，移栽成活率可達90%以上。當新葉長出、新根伸長時，每周用0.3%一0.5%磷酸二氫鉀進行葉面施肥1次，成苗率達80%以上。 中國苗木網,www.cqhuayin.com

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