花卉繁殖，可分有性繁殖（種子繁殖）和無性繁殖（營養(yǎng)器官繁殖），而近來有不少種花卉已采用組織培養(yǎng)手段，這是一種新的常規(guī)繁殖方法。 999苗木網(wǎng),999miaomu.com

    用組織培養(yǎng)的方法進行繁殖是一項先進技術(shù)，可用極少量的繁殖材料，繁殖大量的植株，并可得到去病毒的壯苗，這在某些花卉的商品生產(chǎn)中已成為極有效的繁殖手段。

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    組織培養(yǎng)早在20世紀初即已開始，已有80多年的歷史。近年發(fā)展很快，并廣泛用于花卉登殖，現(xiàn)在由瓊脂培養(yǎng)轉(zhuǎn)向液體培養(yǎng)，即用發(fā)酵罐深層培養(yǎng)，形成微繁殖工業(yè)。目前又在研究人造種子，把用微繁殖技術(shù)形成的不定胚和芽條用球形膠囊包裹起來，形成人造種子。這種人造種子能在適宜條件下，生長發(fā)育成植物體。但這項技術(shù)還有很多問題需要進行研究。

    1．培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件

    （1）培養(yǎng)基成分

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    培養(yǎng)基的成分主要包括無機鹽類（分大量元素和微量元素）、有機物質(zhì)（即維生素等）、車長調(diào)節(jié)物質(zhì)以及碳源等四大類：

    ①無機鹽類：植物所需的十大元素，除碳、氫、氧由水和空氣中供給外，其他氮、磷、焊、硫、鈣、鎂、鐵等七種均需加到培養(yǎng)基中；微量元素有硼、錳、鋅、鑰、鉆、碘、銅等。 中國苗木網(wǎng),www.cqhuayin.com

    ②有機物質(zhì)：主要是維生素和氨基酸，如民和民以及煙酸等。

    ③生長調(diào)節(jié)質(zhì)：主要有細胞分裂素和生長素兩類。目前用得較多的細胞分裂素有：激動素、玉米素乃及異戊烯基腺嘌吟等，能促進芽的分化；生長素有吲跺乙酸、吲哚丁酸、萘乙酸，能促進生長。 中國苗木網(wǎng),999miaomu.com

    ④碳源：因組織培養(yǎng)時植物體處于他養(yǎng)情況下，故必須有能源供給，主要是蔗糖。 999中國苗木網(wǎng),999miaomu.com

    （2）培養(yǎng)基的種類 苗木網(wǎng),999miaomu.com

    培養(yǎng)基的種類很多，采用哪一種培養(yǎng)基，對于培養(yǎng)是否成功有很大的關(guān)系，在1950～19艦?zāi)瓿醭２捎肳hite培養(yǎng)基，但后來有很多新的培養(yǎng)基，其中Ms是Murashige和skoog1962； ER是Erikssonl965； B5是Gambor等1968； SH是shenk和Hildebrandt l972； HE是Heller1953提出來的，見表1表2。

    這些培養(yǎng)基中MS培養(yǎng)基應(yīng)用最廣泛。ER培養(yǎng)基與MS培養(yǎng)基相似。B5培養(yǎng)基在愈傷組織和懸浮培養(yǎng)方面做了不少試驗，對有些植物很適合，SH培養(yǎng)基與B5相似。HE培養(yǎng)基為歐洲許多實驗室所用，但礦物鹽濃度稍低，應(yīng)用范圍不太廣。在花卉組織培養(yǎng)中用MS培養(yǎng)基最多。 中國苗木網(wǎng),999miaomu.com

    （3）引培養(yǎng)條件 中國苗木網(wǎng),www.cqhuayin.com

    培養(yǎng)條件，按培養(yǎng)對象的種類不同而有所不同，溫度條件一般在23～26℃左右的恒溫條件下。光照條件對器官形成有作用，一般范圍是1000～3000勒克司，每日12～16小時，高于3000勒克司有強烈抑制作用。培養(yǎng)室要求清潔衛(wèi)生，減少污染。

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    2.花卉組織培養(yǎng)的途徑 999中國苗木網(wǎng),www.cqhuayin.com

    在花卉組織培養(yǎng)實踐中，用植物的組織或細胞培養(yǎng)成植株，也就是試管培養(yǎng)，可以通過三條途徑。

    （1）通過器官發(fā)生 中國苗木網(wǎng),www.cqhuayin.com

    通過由培養(yǎng)的組織，產(chǎn)生芽及根，器官發(fā)生由于培養(yǎng)材料的不同又可分為兩方面：一是培養(yǎng)花卉植物的莖尖產(chǎn)生大量芽，再將芽分離轉(zhuǎn)移培養(yǎng)成植株；二是培養(yǎng)花卉植物器官外植體產(chǎn)生不定芽，發(fā)育成植株。

    （2）通過煎傷組織分化成株

    將花卉植物體的一小片組織培養(yǎng)成愈傷組織，再誘導(dǎo)分化成芽和根，成為完整植株。 999中國苗木網(wǎng),999miaomu.com

    （3）通過胚狀體發(fā)主 999中國苗木網(wǎng),999miaomu.com

    由培養(yǎng)的植株產(chǎn)生愈傷組織，再通過懸浮培養(yǎng)，或直接產(chǎn)生大量的胚狀體，再發(fā)育成完整植株。

    3．花卉組織墻養(yǎng)的操作方法

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    花卉組織培養(yǎng)的操作可分為培養(yǎng)基配制、消毒滅菌、接種、培養(yǎng)等幾方面。

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    （1）培養(yǎng)墓配制 中國苗木網(wǎng),999miaomu.com

    選定培養(yǎng)基以后，需把大量元素、微量元素、有機物都配成母液，擴大倍數(shù)為稀釋液，貯存?zhèn)溆谩Ｊ褂脮r，根據(jù)所需配制的量，在稀釋液中加一些肌醇、水解酪蛋白、蔗糖等，再加鐵鹽（需用乙二胺四乙酸二鈉（Na2一EDTA）加硫酸亞鐵配制成螫合鐵）成營養(yǎng)液，然后吸取需用量，加入培養(yǎng)基中，再測其酸堿度（一般pH值在5．5～6．5之間即可），最后加瓊脂煮沸后分裝入三角瓶或試管中，封口待用。 中國苗木網(wǎng),999miaomu.com

    （2）消毒滅菌

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    消毒滅菌非常重要，關(guān)系到組織培養(yǎng)的成敗。污染的途徑是器皿、用具、材料的帶菌，以及接種室的空氣、墻壁、地板等的不清潔，故必須針對所提及的幾方面，進行嚴密的消毒滅菌。 中國苗木網(wǎng),999miaomu.com

    ①培養(yǎng)基消毒：將配制分裝好培養(yǎng)基的三角瓶或其他容器放入高壓滅菌鍋中，在15磅／英寸2的壓力下，經(jīng)20分鐘高壓滅菌即可。 苗木網(wǎng),www.cqhuayin.com

    ②器皿與用具的消毒：接種用具及玻璃器皿、洗滌材料用的無菌水，用牛皮紙包好后和培養(yǎng)基一起放在高壓滅菌鍋中消毒滅菌。

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    ③接種室消毒：接種室的地面及墻壁，在接種前后均要用1 ：50的新潔爾敏濕性消毒，每次接種前還要用紫外線燈照射消毒30～60分鐘，并用70%的酒精，在室內(nèi)噴霧，以凈化空氣，最后是超凈臺臺面消毒，可用新潔爾敏擦襪及70%酒精消毒。

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    ④材料處理及消毒：花卉組織培養(yǎng)取嫩莖、花托、葉柄、葉片均可，取得材料后，需先清理，去掉多余部分，然后沖洗、洗滌劑洗滌、漂清后放入接種室或超凈臺上，用70％的酒精浸泡半分鐘，進行表面消毒，再在10％的漂粉溶液中消毒10分鐘左右，取出后用無菌水沖洗4～5次，即可接種。一般材料的選擇以幼嫩部分為好。草花用嫩莖、花托為好；球根花卉用莖頂、鱗莖盤、鱗葉等為好。

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    （3）接種

    接種用的鉗子、解剖刀、接種針等均需在火焰上消毒后用，用后再消毒。將消毒好的材料置于培養(yǎng)皿中，用解剖刀切去其邊緣，再切成小塊接種在培養(yǎng)基上，使組織塊與培養(yǎng)基密合，不得將材料陷于培養(yǎng)基中，接好后隨即將瓶口封好待培養(yǎng)。

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    （4）培養(yǎng)

    接種完畢后即可置于培養(yǎng)室，在恒溫、加光條件下進行培養(yǎng)，培養(yǎng)一段時間后，根據(jù)情況將材料從誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)到分化培養(yǎng)基（也有只用一種培養(yǎng)基就可直接誘導(dǎo)分化成綠苗的），最后轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基上。 苗木網(wǎng),999miaomu.com

    （5）試管苗移栽 999中國苗木網(wǎng),www.cqhuayin.com

    試管苗發(fā)根后，必須隨即轉(zhuǎn)移到栽培基質(zhì)中去，這種基質(zhì)可以用培養(yǎng)土、蛭石、珍珠巖等配成。將試管苗從瓶中耿出，洗去殘存的培養(yǎng)基，移植到準備好的基質(zhì)中去，隨即用細噴壺噴水后加玻璃或塑料罩，3～4日內(nèi)不必澆水，以后澆些清水，1周后見苗已挺直，可去罩澆培養(yǎng)液（過去所用培養(yǎng)基的大量及微量元素減半配成），以利生長，2～4周后可進行常規(guī)栽培。 999苗木網(wǎng),999miaomu.com