玫瑰的組織培養技術 |
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| 來源： 作者： 發布時間：2013-07-27 12:01 |
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1 玫瑰組織培養的意義 1.1 快速繁殖 中國苗木網,999miaomu.com
玫瑰有性生殖能力差，大多觀賞價值高的品種不形成種子，種子繁殖不現實。而玫瑰實生苗觀賞價值較差，因此生產上必須通過野薔薇扦插再嫁接進行繁殖。利用組織培養技術可以實現玫瑰優良品種的快速繁殖，并且能保持原有的優良性狀不變。玫瑰組培增殖系數為４～５，半年至一年內能獲得上百萬種苗。 苗木網,999miaomu.com 1.2 獲得無病毒植株 999苗木網,999miaomu.com 玫瑰在生長過程中，能感染一種或數種病毒或類病毒。長期營養繁殖，如扦插、嫁接、分株，不僅不能脫毒，反而使病毒積累，嚴重影響玫瑰的品質，導致玫瑰觀賞價值下降，比如花徑變小、色澤變淡、產花減少、斑點較多、花形不規則、易感染病蟲等。通過組織培養技術，利用玫瑰莖尖脫毒后，使玫瑰的種性得到復壯，生長勢增強，花徑增大，色澤鮮艷，抗病能力提高，產花量上升。 999中國苗木網,999miaomu.com 1.3 培育新品種 苗木網,999miaomu.com
在組織培養過程中往往會發生芽變，芽變的結果導致花色變異、花的大小變異、花期變異、葉色變異、染色體數量變異等。在組織培養過程中，一旦發生芽變，準確切取變異芽，并將其繁殖成完整植株，可產生有特殊觀賞價值的新品種。 999苗木網,999miaomu.com 1.4 種質資源的保存 中國苗木網,999miaomu.com 玫瑰種質資源豐富，按傳統方法保存種質資源占地面積大，且資源易受人為因素和環境因素的破壞而丟失。用組培方法，用極小的空間就可長期有效地保存玫瑰的種質資源。 苗木網,999miaomu.com
2 玫瑰組織培養的方法 苗木網,www.cqhuayin.com 2.1 外植體選取 999苗木網,999miaomu.com 從生長在田間或盆栽的優良品種植株上，選取生長健壯、無病蟲害的當年生枝條的莖尖和幼莖。取材最好在晴天正午，并且取用植株上部的幼莖。陰雨天或靠近地面的幼莖，表面污染較為嚴重，難于消毒。玫瑰除用莖尖和幼莖做外植體外，也可以用葉片、葉柄、根、莖、原生質體、胚、花藥、子房、花萼和花托做外植體。 999苗木網,999miaomu.com 2.2 消毒滅菌及無菌苗的建立 中國苗木網,www.cqhuayin.com 取玫瑰外植體，用5%～10%的次氯酸鈉浸泡10～30min或用01%～02%的HgCl浸泡5～15min。用無菌水清洗7～10次后接種。也可先用75%的酒精浸泡20～30s再采用上述方法消毒。消毒滅菌完畢后，將幼莖切割成05～10cm長的至少帶有一個節的切段，接種于培養基中。 苗木網,www.cqhuayin.com 2.3 愈傷組織的誘導 苗木網,www.cqhuayin.com
最早報道從雜交茶香月季的莖上誘導了愈傷組織，該實驗證明在培養基中添加2，4-D或添加NAA和激動素KT均能很快誘導出愈傷組織。隨后不同實驗以不同品種為試驗材料，從葉、葉柄、根、莖、原生質體、合子胚、花藥、子房、花瓣、花萼、和花托成功地誘導了愈傷組織。 苗木網,www.cqhuayin.com
2.3.1 愈傷組織的成功誘導與品種的基因型有關 苗木網,999miaomu.com 2.3.2 外植體類型：不同外植體愈傷產生的能力不同，葉為90%，根為70%，節間為55%，花藥為19%。 999中國苗木網,www.cqhuayin.com 2.3.3 激素 999苗木網,999miaomu.com Rout等（1991）以Landora為材料，在添加BA和NAA，2，4-D的MS的培養基上，外植體在接種的7～12d后，在近軸面的葉柄和中脈處產生愈傷，愈傷組織誘導頻率高達92%。在接種后15～20d，外植體莖切端處產生愈傷，誘導率為76%。生長素種類和濃度對愈傷產生能力的影響同樣很大。早期實驗多采用NAA結合BAP或BA等，近年來多采用2，4—D，并證明2，4—D是誘導愈傷的必要因素（Kintzios等，1999；Rout等，1996；van der Salm等，1996；Vises—suwan等，1997）。進一步研究發現2，4-D對愈傷的誘導效果依賴于月季的基因型，如2，4—D濃度從113umol/L增加到181umol/L降低了Rose hybrida栽培種“Care-freeBeauty”的愈傷誘導頻率，但該濃度則對另一個品種“Grand Gala”無影響。對于“Red Sunblaze”而言，當濃度從113umol/L增加到452umol/L，則表現出愈傷的誘導率提高了，隨后當2，4—D再增加，則顯著地降低愈傷的誘導頻率。愈傷組織在誘導愈傷組織的培養基上能得到很好繼代培養（subculture、Li等，2002）。Van der Salm等（1996）證明2，4—D對誘導Rose persica與xanthina和Moneyway產生愈傷是非常必要的，進一步添加低濃度的BA有正效應，但如BA濃度過高，則產生抑制作用。與以上實驗結果不同，Kintzios等（1999）則發現2，4—D對愈傷誘導有負影響作用，可能因為采用的外植體是成熟的葉片。 999中國苗木網,www.cqhuayin.com |
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