花卉繁殖綜述(四) |
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來源: 作者: 發布時間:2013-07-27 12:01 |
培養基的種類很多,采用哪一種培養基,對于培養是否成功有很大的關系,在1950~19艦年初常采用White培養基,但后來有很多新的培養基,其中Ms是Murashige和skoog1962; ER是Erikssonl965; B5是Gambor等1968; SH是shenk和Hildebrandt l972; HE是Heller1953提出來的,見表1表2。 中國苗木網,www.cqhuayin.com
這些培養基中MS培養基應用最廣泛。ER培養基與MS培養基相似。B5培養基在愈傷組織和懸浮培養方面做了不少試驗,對有些植物很適合,SH培養基與B5相似。HE培養基為歐洲許多實驗室所用,但礦物鹽濃度稍低,應用范圍不太廣。在花卉組織培養中用MS培養基最多。 中國苗木網,999miaomu.com (3)引培養條件 中國苗木網,www.cqhuayin.com
培養條件,按培養對象的種類不同而有所不同,溫度條件一般在23~26℃左右的恒溫條件下。光照條件對器官形成有作用,一般范圍是1000~3000勒克司,每日12~16小時,高于3000勒克司有強烈抑制作用。培養室要求清潔衛生,減少污染。 苗木網,www.cqhuayin.com 2.花卉組織培養的途徑 中國苗木網,www.cqhuayin.com 在花卉組織培養實踐中,用植物的組織或細胞培養成植株,也就是試管培養,可以通過三條途徑。 999中國苗木網,999miaomu.com (1)通過器官發生 999苗木網,999miaomu.com
通過由培養的組織,產生芽及根,器官發生由于培養材料的不同又可分為兩方面:一是培養花卉植物的莖尖產生大量芽,再將芽分離轉移培養成植株;二是培養花卉植物器官外植體產生不定芽,發育成植株。 苗木網,999miaomu.com (2)通過煎傷組織分化成株 999中國苗木網,999miaomu.com 將花卉植物體的一小片組織培養成愈傷組織,再誘導分化成芽和根,成為完整植株。 999苗木網,www.cqhuayin.com (3)通過胚狀體發主 999苗木網,www.cqhuayin.com
由培養的植株產生愈傷組織,再通過懸浮培養,或直接產生大量的胚狀體,再發育成完整植株。 苗木網,www.cqhuayin.com
3.花卉組織培養的操作方法 999苗木網,999miaomu.com 花卉組織培養的操作可分為培養基配制、消毒滅菌、接種、培養等幾方面。 中國苗木網,www.cqhuayin.com (1)培養墓配制 中國苗木網,www.cqhuayin.com 選定培養基以后,需把大量元素、微量元素、有機物都配成母液,擴大倍數為稀釋液,貯存備用。使用時,根據所需配制的量,在稀釋液中加一些肌醇、水解酪蛋白、蔗糖等,再加鐵鹽(需用乙二胺四乙酸二鈉(Na2一EDTA)加硫酸亞鐵配制成螫合鐵)成營養液,然后吸取需用量,加入培養基中,再測其酸堿度(一般pH值在5.5~6.5之間即可),最后加瓊脂煮沸后分裝入三角瓶或試管中,封口待用。 999中國苗木網,www.cqhuayin.com
(2)消毒滅菌 999中國苗木網,www.cqhuayin.com
消毒滅菌非常重要,關系到組織培養的成敗。污染的途徑是器皿、用具、材料的帶菌,以及接種室的空氣、墻壁、地板等的不清潔,故必須針對所提及的幾方面,進行嚴密的消毒滅菌。 中國苗木網,999miaomu.com
①培養基消毒:將配制分裝好培養基的三角瓶或其他容器放入高壓滅菌鍋中,在15磅/英寸2的壓力下,經20分鐘高壓滅菌即可。 999苗木網,www.cqhuayin.com ②器皿與用具的消毒:接種用具及玻璃器皿、洗滌材料用的無菌水,用牛皮紙包好后和培養基一起放在高壓滅菌鍋中消毒滅菌。 999中國苗木網,www.cqhuayin.com
③接種室消毒:接種室的地面及墻壁,在接種前后均要用1 :50的新潔爾敏濕性消毒,每次接種前還要用紫外線燈照射消毒30~60分鐘,并用70%的酒精,在室內噴霧,以凈化空氣,最后是超凈臺臺面消毒,可用新潔爾敏擦襪及70%酒精消毒。 中國苗木網,999miaomu.com ④材料處理及消毒:花卉組織培養取嫩莖、花托、葉柄、葉片均可,取得材料后,需先清理,去掉多余部分,然后沖洗、洗滌劑洗滌、漂清后放入接種室或超凈臺上,用70%的酒精浸泡半分鐘,進行表面消毒,再在10%的漂粉溶液中消毒10分鐘左右,取出后用無菌水沖洗4~5次,即可接種。一般材料的選擇以幼嫩部分為好。草花用嫩莖、花托為好;球根花卉用莖頂、鱗莖盤、鱗葉等為好 苗木網,www.cqhuayin.com (3)接種 中國苗木網,999miaomu.com 接種用的鉗子、解剖刀、接種針等均需在火焰上消毒后用,用后再消毒。將消毒好的材料置于培養皿中,用解剖刀切去其邊緣,再切成小塊接種在培養基上,使組織塊與培養基密合,不得將材料陷于培養基中,接好后隨即將瓶口封好待培養。 999苗木網,999miaomu.com (4)培養 中國苗木網,www.cqhuayin.com
接種完畢后即可置于培養室,在恒溫、加光條件下進行培養,培養一段時間后,根據情況將材料從誘導愈傷組織的培養基轉到分化培養基(也有只用一種培養基就可直接誘導分化成綠苗的),最后轉移到生根培養基上。 苗木網,www.cqhuayin.com (5)試管苗移栽 999苗木網,www.cqhuayin.com 試管苗發根后,必須隨即轉移到栽培基質中去,這種基質可以用培養土、蛭石、珍珠巖等配成。將試管苗從瓶中耿出,洗去殘存的培養基,移植到準備好的基質中去,隨即用細噴壺噴水后加玻璃或塑料罩,3~4日內不必澆水,以后澆些清水,1周后見苗已挺直,可去罩澆培養液(過去所用培養基的大量及微量元素減半配成),以利生長,2~4周后可進行常規栽培。 中國苗木網,999miaomu.com
苗木網,999miaomu.com (記者 中華園林網)
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