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墨蘭組織培養(yǎng)

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來源: 作者: 發(fā)布時間:2013-07-27 11:51
 組織培養(yǎng)就是根據(jù)植物細胞具有的全能性、再生能力和分生能力.從蘭株體上取下莖尖分生組織,接種到培養(yǎng)基上,在無菌條件下,利用玻璃容器進行培養(yǎng),使其形成新植株的方法。此方法是快速繁殖和保存種質(zhì)材料及培育無病毒苗的一種好方法,是現(xiàn)代最先進的繁殖方法。

  一、組織培養(yǎng)的優(yōu)越性
  
  1、能夠保持母本的優(yōu)良性狀,使上一代的優(yōu)良性狀穩(wěn)定地遺傳下來。
  
  2、節(jié)約繁殖材料,采用一小部分莖尖、側(cè)芽、幼葉尖、休眠芽或花序,就能繁殖出大量的中國蘭花。
  
  3、快速。從優(yōu)良的母本取一小塊組織,在合適的條件下經(jīng)過離體培養(yǎng),一年之內(nèi)就能繁殖出上萬蘭苗。例如,將墨蘭初生莖的頂芽切割成2~3毫米,在一年內(nèi)就能繁殖出上萬甚至幾十萬株幼苗。
  
  4、節(jié)省土地。組織培養(yǎng)的材料是三角瓶或試管,可以充分利用空間。例如,一間30平方米的培養(yǎng)室就能擺放1萬多個三角瓶,可繁殖幾萬株苗,且周轉(zhuǎn)快,全年均可連續(xù)培養(yǎng)。

  二、組織培養(yǎng)的設(shè)備設(shè)施
  
  組織培養(yǎng)的設(shè)備包括準備室、接種室和培養(yǎng)室。具體設(shè)備有晾干架、實驗臺、藥品柜、冰箱、PH計、高壓消毒鍋、培養(yǎng)基分裝器、烘箱、溫箱、攪拌器、離心機、電爐、蒸餾器、天平、軟木塞打孔器、溫濕調(diào)節(jié)設(shè)備、日光燈、培養(yǎng)架、轉(zhuǎn)床、培養(yǎng)箱、超凈工作臺、接種箱、搖床、燒杯、培養(yǎng)皿、三角瓶、量筒、滴管、移液管、針筒、定容瓶、鑷子、試管、剪刀、解剖刀、接種針。 苗木網(wǎng),999miaomu.com

  三、組織培養(yǎng)的操作方法
  
  1、植物材料的滅菌及切取
  
  從墨蘭組織培養(yǎng)的外植體均取自分生組織,最常用的為莖尖。莖尖的切取應(yīng)在無菌接種室的超凈工作臺上完成。選擇生長旺盛的植株,剝?nèi)ト~片,取下莖尖。先用無菌水清洗干凈,除去殘留的鞘、葉基等,再用70%~75%酒精浸泡10~30秒,取出后在5%~10%的漂白粉溶液中浸10~15分鐘,再用無菌水沖洗干凈,在實體顯微鏡下挑出莖尖生長點,立即接種到試管里的培養(yǎng)基上。
  
  2、培養(yǎng)基的配制
  
  用于組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基與用于種子萌發(fā)的培養(yǎng)基基本上相似,但也不盡相同。下面介紹一種蘭屬植物適用的培養(yǎng)基,以供大家參考。
  
  培養(yǎng)基配方:花寶l號含量:3克,香蕉含量:30克,蛋白胨含量:2克,蘋果含量:20克,甘氨酸含量:0.02克,蔗糖含量:25克,肌醇含量:0.1克,甘露醇含量:1克,卡基腺嘌呤含量:0.002克,瓊脂含量:12克,腺嘌呤含量:0.002克,椰子水含量:50亳升,蒸餾水含量:加至1000毫升。
  
  3、培養(yǎng)原球體
  
  接種30~45天后.形成小而圓的原球體。將原球體一分成四,放到培養(yǎng)基上培養(yǎng),30~60天后,又可長出原球體,按照上述方法重新培養(yǎng),這樣,在短時間可獲取大量的原球體。

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  4、旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)
  
  將原球體切割成組織,放入試管內(nèi)的液體培養(yǎng)基中,立即放于旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)床上旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)。
  
  5、分化培養(yǎng)
  
  在旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)床上培養(yǎng)一段時間后,小塊稍微長大,取 出接種在分化培養(yǎng)基上,放于分化室中培養(yǎng)15天左右,逐漸長出芽和根,進一步形成蘭花小植株。
  
  6、移植試管苗

  當(dāng)蘭花苗長出3~4片葉.具3~4條根后,可進行移植。移植之前應(yīng)打開瓶蓋,使之逐漸適應(yīng)新的環(huán)境,然后從試管中取出幼苗,用自來水輕輕沖洗,把附著在幼苗上的培養(yǎng)基等雜物沖洗干凈,然后移植于培養(yǎng)土或蛭石等基質(zhì)中,放在溫室中培養(yǎng)。
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