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    (1)愈傷組織的誘導

    配制初代培養基：初代培養基的主要植物需要成分有大量元素、微量元素、有機成分、激素和蔗糖，準確量取培養基的各成分，并充分混合成混合溶液；然后溶解瓊脂，待完全溶化后加入混合溶液、蒸餾水至刻度線，最后將培養基的pH值調至5.8。最適不定芽誘導培養基為MS+0.5mg/LKT+0.5mg/L6-BA，不定芽增殖培養基為MS+1.5mg/LKT+0.05mg/L6-BA，不定根培養基為MS+0.3mg/LNAA。分裝培養基：分裝引流時要確保培養基不污染瓶口，分裝好的培養基做好記號放置于高壓滅菌鍋中滅菌，放置培養基時不要倒置以免培養基倒流出來。 999中國苗木網,999miaomu.com

    (2)選擇

    露地栽培生長健壯的幼齡小球為材料，先在室內消毒過的珍珠巖基質中栽植30天，待新根長出以后，取出用自來水沖凈表層，用手術刀去除須根、葉和鱗莖上部的鱗片，只保留鱗莖盤。清理好的鱗莖盤用自來水沖洗干凈，并用濾紙吸干水分置于超凈工作臺上備用。在接種前先用75%的酒精浸泡鱗莖盤30～60秒，用無菌水沖洗一次，然后用0.1%的氯化汞溶液消毒15分鐘，最后用無菌水浸泡3～5次、每次5～10分鐘，并用無菌鑷子不斷攪動，去除殘留在外植體上的氯化汞。將消毒好的材料放在無菌濾紙上吸干水分，切成5mm×5mm×5mm大小的外植體塊接種于已配制好的培養基中，一瓶培養基只接種一個切塊。接種好的外植體放置在培養室中培養。培養溫度為20～25℃，每天光照時間為10～20小時，光照強度為1000—20001x。愈傷組織塊不能切得太小，否則分化會太慢；若愈傷組織塊太大很快就會長滿瓶，不易取出，故其大小要適宜。 苗木網,www.cqhuayin.com

    (3)不定芽的生根培養 苗木網,999miaomu.com

    將繼代培養好的小芽切下分別接種于的培養基中。在操作過程中一定要將小芽基部的愈傷組織切除干凈，否則根會長在愈傷組織上，影響其成活率。

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    (4)生根小苗的移栽 苗木網,999miaomu.com

    試管苗不經過生根可以直接出瓶。小苗生根后先打開瓶口，讓小苗在室外適應外界環境，2～3天后取出瓶苗，洗凈瓶苗基部的瓊脂，最后將小苗移栽至壤土∶腐葉土∶河沙為5∶3∶1(體積比)基質中，成活率可達98%。在洗苗過程中一定要洗凈瓊脂，防止滋生微生物。 苗木網,999miaomu.com

    (5)朱頂紅取材最好在生長旺盛的春季，以確保其具備較強的分生能力。 中國苗木網,www.cqhuayin.com

    在培養過程中發現朱頂紅的鱗片與鱗片之間的夾層有凸起出現，上部產生數個小仔球，小仔球上部逐漸變綠，將獨立的小仔球轉入繼代培養基中數日后形成小球叢。朱頂紅比較容易感染病菌，最常見的是紅斑病。取材時須取無病蟲害的部位，或引進種子在試管中播種，生根發芽后再進行培養。若材料豐富，可在解剖顯微鏡下剝取莖尖的途徑來獲得無病毒的材料。但此方法會使生長點長得很慢，周期很長，一般從誘導至生根培養需90～120天。據本試驗觀察發現，組培苗具有一定的馴化現象，經過長時間的繼代培養后，只要加入極少量激素也可以達到一開始培養的效果；在煉苗過程中，發現球根花卉一般比較容易成活，試驗認為，朱頂紅不經過生根可以直接移入基質中，成活率可達98%；朱頂紅在組織培養中，芽增殖率高，球小，須進行壯苗培養以后生根，但在增殖培養基MS+lmg/LKT+0.1mg/LNAA中產生不定根，無需進行生根培養；朱頂紅的生長需要充足的光照，光照適宜，葉大、厚、肥且具有光澤，花大且艷；光照不足則抽出的花葶開不出花，由頂部花苞逐漸向下枯萎，葉子細且失去光澤、失綠；朱頂紅具有很強的向光性。在朱頂紅組培中，要特別注意試驗的激素配比，在MS+1mg/LKT+0.1mg/LNAA的培養基中既生根又長芽，愈傷組織很少；只加糠基腺嘌呤不長根。結果認為分裂素與生長素比值小，有利于生根，相反則分化形成芽或愈傷組織。朱頂紅組培苗煉苗在帶有防蟲網的玻璃溫室內進行，基質要進行消毒，先用甲醛密封熏蒸7天，再打開讓甲醛徹底揮發，裝入營養缽內待用。 中國苗木網,www.cqhuayin.com