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金邊鳳尾蘭的脫毒及組培快繁

來源：作者：發布時間：2013-07-27 11:36

金邊鳳尾蘭為百合科絲蘭屬鳳尾蘭的一個園藝品種,是觀賞價值極高的常綠灌木。常年濃綠,數株成叢,高低不一。開花時花莖高聳挺立,繁多的白花下垂,姿態優美,可布置在花壇中心、池畔、臺坡和建筑物附近,原產北美東南部,我國各地均有栽培。由于其葉片金邊和巨大的花序十分引人注目,且生長勢強健,栽培要求不高,很受人們歡迎,是優良的常綠、彩葉綠化樹種。目前金邊鳳尾蘭生產上存在的主要問題是病毒造成的品種退化,使產量降低、植株矮化,大大降低了商品價值。金邊鳳尾蘭常見的繁殖方式有扦插或分株繁殖等,繁殖系數低,費時長,且金邊性狀易消失,影響觀賞質量。采用組織培養能有效保留金邊性狀,達到快速繁殖的目的。因此,用脫毒與組培快繁技術提高產量、改善品質就成為金邊鳳尾蘭栽培取得高經濟效益的關鍵。
    1莖尖培養脫毒
    侵染金邊鳳尾蘭的病毒主要有金邊鳳尾蘭褪綠斑駁病毒、皺葉病毒等。一般帶毒植株在35~38℃條件下種植2個月,經高溫熱處理,就能使病毒失去活性。為了徹底消除病毒,可將植株栽培在熱處理條件下,處理一段時間后,再采取其莖尖進行離體培養,這樣脫毒效果更好。
    1.1材料選擇及消毒
    金邊鳳尾蘭外植體材料要選擇品種優良、生長健壯、無病蟲害的植株。截取帶葉莖干,逐層剝去葉片,然后切留2cm帶頂莖段,用洗滌液或洗衣粉液充分洗滌,再用清水反復沖洗,置于超凈臺上放入0.1%的升汞溶液內消毒8~10min,取出后用無菌水沖洗3~5次。消毒及沖洗過程中要不斷搖動,使藥劑充分接觸,消毒徹底。

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    1.2剝取莖尖
    帶頂莖段消毒后,放在無菌紙上吸干水分,在超凈臺無菌條件下,用鑷子及解剖刀剝去嫩葉,露出生長錐。移入25~50倍解剖鏡下,用刀尖切下0.3~0.5mm的生長點,并帶1~2個葉原基,迅速接種到培養基上,防止莖尖脫水。接種時應使莖尖向上,不能倒置。莖尖剝離的大小是脫毒效果的關鍵技術。莖尖剝離越小,脫除病毒的效果越好,但接種不易成活;莖尖剝離得越大,接種成活率越高,但脫除病毒的效果差。
    1.3結合熱處理脫毒莖尖培養
    將帶毒植株進行盆栽,放入人工控制箱內經38~40℃高溫處理6~8周,采切0.5mm大小的莖尖培養,脫除褪綠斑駁病毒、皺葉病毒等。結合經高溫熱處理和莖尖培養脫除病毒,操作簡便,容易掌握,脫毒效果好,莖尖培養成活率高。
    1.4無毒莖尖的培養
    將剝取的莖尖在MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖3%+瓊脂0.6%,pH值5.8的培養基上培養,培養溫度控制在25±1℃,光照強度為1 000~2 000Lx,每天光照10~12h,室內相對濕度控制在60%~70%。光照過強時,葉片容易失水而黃化。培養試管內空氣濕度大,有利金邊鳳尾蘭生長。一般培養4d后開始出現愈傷組織,6d后在切口處長出淡黃不透明的愈傷組織塊,經1周左右的培養,即可觀察到莖尖形成約2~3mm的小芽點,隨后芽點轉綠膨大,2周時可見到萌發出多個綠芽;25d后,綠芽逐漸抽莖長葉;培養1個月左右時,株高可達2cm。

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    1.5無病毒苗的鑒定
    當莖尖培養達到一定數量后,取出部分作嚴格的病毒檢測。用抗血清法、電子顯微鏡檢測法、ELISA法或指示植物法進行病毒的鑒定,以確保脫毒后的試管苗不含病毒。
    2 快速繁殖
    2.1 繼代增殖
    經鑒定合格后,可繼代擴大增殖。金邊鳳尾蘭的繼代增殖以莖段增殖或叢生芽增殖,這種方式繁殖速度快、增殖倍數高、種性變異小、成苗率高。繼代培養與莖尖分化采用相同的培養基MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖3%+瓊脂0.6%,pH值5.8,培養溫度25±1℃,光照強度2 000~3 000Lx,每天光照14~16h,能分化大量不定芽,形成無根苗。當培養基顏色逐漸變暗灰色,不定芽發生轉移后,應轉移到新的培養基上。25d后,每個芽周圍又可長出2~3個不定芽,60d長成2~3cm的叢狀芽,此時即可切下來再進行繼代培養。以后每25d可繼代增殖1次,反復進行繼代增殖,就能在較短時間內繁殖出大量嫩芽。
    2.2 生根培養
    金邊鳳尾蘭需經生根培養后,才能移栽。當增殖培養過程中所產生的不定芽長至2~3cm高以上時,可將其在無菌條件下從基部切割下來,然后轉接到生根培養基上以誘導生根。生根培養基成分為1/2MS+NAA 0.2mg/L+蔗糖3%+瓊脂0.6%+活性炭0.3%。1周后,嫩莖基部形成愈傷組織,培養2~3周生根。中國苗木網,www.cqhuayin.com
    2.3移栽與管理
    待組培苗在瓶內培養形成大量完整的根系時,即可煉苗移栽。將培養瓶由培養室轉移到普通房間中,打開瓶蓋,置室溫和自然光照下煉苗3~5d,使幼苗逐漸適應外界環境條件。移栽時可先往瓶中加少量清水,并搖動培養基,然后用鑷子把苗輕輕取出,洗去根部帶的培養基,以防雜菌滋生,再栽植于經過干熱滅菌處理的蛭石內,栽后澆足水,盤上用塑料薄膜罩嚴,以減少水分蒸發。5d后逐漸揭膜見光,及時通風換氣,定期噴藥,防止有害菌類的污染,提高試管苗的成活率。為了預防真菌或細菌引起的病害,也可將苗用高錳酸鉀溶液浸泡1~2min,稍晾干后栽植。基質濕度是根系成活的關鍵,移栽時應注意嚴格控制基質的水分,既要保持基質濕潤,又要防止水分過多造成爛苗。移栽初期幼苗有轉黃現象,這是因為初期不適應所致,并不影響成活率。經2周的過渡,植株又恢復生長,葉片逐漸轉綠。當抽出新葉時,便可移植于大田。

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