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植物組培外植體的選擇

來源：作者：發布時間：2013-07-23 17:15

　　1、外植體的選擇
　　外植體是指植物組織培養中的各種接種材料。從理論上講，植物細胞都具有全能性，能夠再生新植株，任何器官、任何組織、單個細胞和原生質體都可以作為外植體。但實際上，不同品種、不同器官之間的分化能力有巨大差異，培養的難易程度不同。為保證植物組織培養獲得成功，選擇合適的外植體是非常重要的。
　�。�1）選擇優良的種質及母株
　　無論是離體培養繁殖種苗，還是進行生物技術研究，培養材料的選擇都要從主要的花卉植物入手，選取性狀優良的種質、特殊的基因型和生長健壯的無病蟲害植株。尤其是進行離體快繁，只有選取優良的種質和基因型，離體快繁出來的種苗才有意義，才能轉化成商品；生長健壯無病蟲害的植株及器官或組織代謝旺盛，再生能力強，培養后容易成功。
　　（2）選擇適當的時期
　　組織培養選擇材料時，要注意植物的生長季節和生長發育階段，對大多數植物而言，應在其開始生長或生長旺季采樣，此時材料內源激素含量高，容易分化，不僅成活率高，而且生長速度快，增殖率高。若在生長末期或已進入休眠期時采樣，則外植體可能對誘導反應遲鈍或無反應�；ㄋ幣囵B應在花粉發育到單核靠邊期取材，這時比較容易形成愈傷組織。百合在春夏季采集的鱗莖、片，在不加生長素的培養基中，可自由地生長、分化；而其他季節則不能。葉子花的腋芽培養，如果在1月至翌年2月間采集，則腋芽萌發非常遲緩；而在3-8月間采集，萌發的數目多，萌發速度快。

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　�。�3）選取適宜的大小
　　培養材料的大小根據植物種類、器官和目的來確定。通常情況下，快速繁殖時葉片、花瓣等面積為5mm2，其他培養材料的大小為0.5~1.0cm。如果是胚胎培養或脫毒培養的材料，則應更小。材料太大，不易徹底消毒，污染率高；材料太小，多形成愈傷組織，甚至難以成活。
　�。�4）外植體來源要豐富
　　為了建立一個高效而穩定的植物組織離體培養體系，往往需要反復實驗，并要求實驗結果具有可重復性。因此，就需要外植體材料豐富并容易獲得。
　�。�5）外植體要易于消毒
　　在選擇外植體時，應盡量選擇帶雜菌少的器官或組織，降低初代培養時的污染率。一般地上組織比地下組織消毒容易，一年生組織比多年生組織消毒容易，幼嫩組織比老齡和受傷組織消毒容易。
　　2、外植體取材的部位
　　植物組織培養的材料幾乎包括了植物體的各個部位，如莖尖、莖段、花瓣、根、葉、子葉、鱗莖、胚珠和花藥等。
　�。�1）莖尖
　　莖尖不僅生長速度快，繁殖率高，不容易發生變異，而且莖尖培養是獲得脫毒苗木的有效途徑。因此莖尖是植物組織培養中最常用的外植體。
　�。�2）節間部
　　大部分果樹和花卉等植物，新梢的節間部是組織培養的較好材料。新梢節間部位不僅消毒容易，而且脫分化和再分化能力較強，因此是常用組織培養材料。 999中國苗木網,www.cqhuayin.com
　　（3）葉和葉柄
　　葉片和葉柄取材容易，新出的葉片雜菌較少，實驗操作方便，是植物組織培養中常用的材料。尤其是近年在植物的遺傳轉化中，以葉片為試驗材料的報道很多。
　�。�4）鱗片
　　水仙、百合、蔥、蒜、風信子等鱗莖類植物常以鱗片為材料。
　　（5）其他
　　種子、根、塊莖、塊根、花粉等也可以作為植物組織培養的材料。
　　但是，不同種類的植物以及同種植物不同的器官對誘導條件的反應是不一致的。如百合科植物風信子、虎眼萬年青等比較容易形成再生小植株，而郁金香就比較困難。百合鱗莖的鱗片外層比內層的再生能力強，下段比中、上段再生能力強。選取材料時要對所培養植物各部位的誘導及分化能力進行比較，從中篩選出合適的、最易表達全能性的部位作為為植體。苗木網,999miaomu.com

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