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蘭花的組培

來源：作者：發布時間：2013-07-23 17:14

　　20年了。近些年來，他們與臺灣一家園藝公司合作開展中國蘭花的組織培養研究，并取得了很好的成績。同學們從課外學習中也有很大的收獲。下面刊登的是由該選修課任課老師陳穎推薦的高一年級姜小舟同學撰寫的《中國蘭花的組織培養》一文。
　　我們在學校開設的植物組織培養選修課上，進行了蘭花組培的實驗。下面談談自己在實驗中的一些心得。
　　取外植體
　　首先是種子。在其他植物的組織培養中，一般而言，最容易的是用種子組培，即把種子接入空白培養基即可。而中國蘭花卻不同。由于中國蘭花的種皮內含有大量空氣，不易吸水，種子大多發育不完全，所以很難成功。并且，有一種理論還說中國蘭花的種子是要在特定的細菌作用下才能萌發。所以中國蘭花的種子很難組培成功，我們多次做的種子萌發試驗也沒有成功。
　　其次是芽。我選取的材料是建蘭的芽。我把長得較好的建蘭的大葉和根去掉，留下3厘米的葉子以及其內部。先用自來水沖洗干凈，再用碘伏兌水泡3分鐘，拿出用無菌水沖洗至少5遍，沖干凈后放入75％的乙醇中浸泡30秒鐘拿出，用無菌水沖洗至少5遍，然后放入1‰的氯化汞中浸泡6分鐘至7分鐘，（注意：時間太長會導致褐化，而時間太短會導致消毒不徹底，最終引起污染。）在超凈工作臺中取出，用無菌水沖至少5遍，放在無菌包上，用消過毒的鑷子和刀把葉子層層剝去，直到留下0.5厘米，或者更小的芽為止，然后接入培養基。培養基可用MS＋NAA1--5適量加蘋果和香蕉等。（注意：中國蘭花容易褐化，所以接種時盡量不要讓它暴露在空氣之中。）如不污染兩個月左右就可抽出新葉了。

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　　最后是龍根。龍根的組培過程大致與芽的組培過程相同，但成活的可能性比芽高，不過龍根在市場極為少見。一旦成功其繁殖率極高。
　　組培
　　中國蘭花的組織培養與其他植物大體相同，但由于其容易褐化，所以在組培過程中要注意觀察。用組織培養的方法既容易產生變異的蘭苗，平時應細心觀察，對稍有變異表現的蘭苗或龍根要及時移出，進行單獨接種，并保護繁殖。堅持下去，便可得到有價值的變異蘭苗。如果有褐化的，要及時把褐化部分清除，以免造成整瓶褐化。如果有污染，要進行救治。
　　首先，讓我們來了解一下什么叫做污染。污染的廣義是混入有害的東西，而我們用肉眼能看到的這個“有害的東西”在植物組織培養中指的就是菌，這個“菌”分為兩大類--真菌和細菌。真菌就是組培瓶里那些毛狀的、顏色暗淡，多為白色、灰綠色或棕褐色的物質（如果表面有水，水會成水珠狀并且會流動）。細菌就是組培瓶里那些粘稠狀的、顏色鮮艷，多為紅色、黃色或帶光澤的藍紫色物質（如果表面有水，水會與細菌混合，在細菌表面停留）。真菌污染的原因多是組培瓶等器械暴露在工作臺之外，或在接種完畢封口時操作不當，致使真菌孢子進入瓶內。細菌污染是由于用具等消毒不徹底或接種操作人員在工作中造成消毒后器械的二次污染所致。通過區別真菌污染和細菌污染我們可以找到操作的漏洞，在以后的實踐中改進而減少污染。在救治污染組培苗時要特別注意：真菌污染的組培苗在打開瓶口時，動作要輕，瓶口要背對工作臺送風的方向，盡量避免孢子被風吹起而造成再污染。而細菌污染的組培苗在救治時要把組培苗沾染異物部位切掉。中國苗木網,www.cqhuayin.com
　　1．取出
　　先用鑷子夾取出中國蘭花，再用剪刀把已污染的部分剪掉（剪完后剪刀和鑷子一定要放入酒精中消毒，下次用之前還要用火烤）。注意要盡量不帶出培養基（因為瓶中所有的物質全部被污染），并且要把已有明顯污染的部分去掉。
　　2．洗滌
　　先把污染的中國蘭花放入75％的酒精中靜置或晃動30秒再放入1‰的氯化汞溶液（注意：由于氯化汞有劇毒，所以小心使用）中靜置消毒5分鐘到9分鐘（注意：時間太長對蘭花有害，時間太短容易造成消毒不徹底），由于氯化汞難以去除，只有流水沖洗才會去掉，用無菌水至少五次震蕩清洗，才能去掉殘留氯化汞。

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