蘆薈是百合科蘆薈屬多年生常綠多肉質(zhì)草本植物。近年來,由于蘆薈化學(xué)及藥理學(xué)研究的深入,巳形成了一股世界性的蘆薈保健熱。蘆薈的栽培產(chǎn)業(yè)也已開始在我國興起,但由于蘆薈不能自花授粉結(jié)實(shí),因此,用種子繁殖非常困難。目前的繁殖方法主要是分株和分蘗,但難以快速、大量地繁殖種苗,這也是當(dāng)前蘆薈種苗昂貴的重要原因之一。本文介紹一種對蘆薈莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)快速繁殖試管苗的技術(shù),利用這項(xiàng)技術(shù)可在短期內(nèi)繁殖上百萬株的種苗,具有成本低,效益高的特點(diǎn)。 一、材料和培養(yǎng)基 l0-l5cm高的蘆薈幼苗;愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+(1一6mg/L)BA+(0.1一0.5mg/L)NAA;分化培養(yǎng)基為MS+(2-4mg/L)BA+(0.1-0.5mg/L)NAA;生根培養(yǎng)基為MS+(0.1一0.5mg/L)IBA+(2一5mg/L)PP33。 二、繁殖方法 (一)愈傷組織培養(yǎng)將準(zhǔn)備好的蘆薈幼苗在清水中沖洗數(shù)次,剪去葉片和大部分莖段,取莖尖部分,再沖洗1-2次,淋干。在超凈臺上,先用75%的乙醇將莖尖浸泡30-60s,再用升汞浸5-l0min,最后用無菌水沖洗數(shù)次。用解剖刀取出包括莖尖生長點(diǎn)的組織切塊,接種到愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上。培養(yǎng)條件為:每天光照10-12h,光照度為1000一2000Lx,溫度(25士)2℃。大約15-25d后,試管中接種的外植體就可以膨大,形成愈傷組織。愈傷組織的形成標(biāo)志著接種的外植體的生長狀態(tài)已脫離分化狀態(tài),開始重新恢復(fù)分生能力。愈傷組織形成1周后,就可將愈傷組織轉(zhuǎn)管進(jìn)行繼代培養(yǎng)或分化培養(yǎng)。 中國苗木網(wǎng),www.cqhuayin.com (二)繼代培養(yǎng)將愈傷組織在無菌條件下,從試管中取出,用鑷子和解剖刀剔除附著在愈傷塊上的培養(yǎng)基,并用無茵水反復(fù)清洗數(shù)次,直至愈傷塊上無殘留培養(yǎng)基為止。用解剖刀將愈傷塊切成數(shù)個(gè)小塊,再接種到裝有愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基的三角瓶中,在與誘導(dǎo)愈傷組織相同的培養(yǎng)條件下繼續(xù)培養(yǎng)。幾天后,三角瓶中的小愈傷塊即可逐漸長大,這一過程稱作繼代培養(yǎng),可反復(fù)操作。通過愈傷組織的繼代培養(yǎng),原來接種的1個(gè)蘆薈莖尖組織可繁殖出大量的新接種材料來,用于分化培養(yǎng)。 (三)分化培養(yǎng)將愈傷組織在無菌條件下,從試管或三角瓶中取出,用無菌水洗凈,切成小接種塊,接種到裝有分化培養(yǎng)基的三角瓶中,分化培養(yǎng)的條件同愈傷組織培養(yǎng)。大約30-50d后,愈傷組織就可分化出芽,并繼續(xù)長出小葉片。當(dāng)分化出的幼苗長到一定高度或分化出一定數(shù)量后,將這些小幼苗在無菌條件下取出,進(jìn)行生根培養(yǎng)或重新誘導(dǎo)分化。 (四)生根培養(yǎng)當(dāng)三角瓶中的幼苗葉片長到3cm左右時(shí),將幼苗在無菌條件下取出,放入裝有生根培養(yǎng)基的三角瓶中培養(yǎng),培養(yǎng)條件同分化培養(yǎng)。大約半個(gè)月后,幼苗即可生根。 (五)煉苗當(dāng)幼苗的根長到一定長度,幼苗形體已顯健壯時(shí)。將幼苗取出,在清水中洗除附著在根上的培養(yǎng)基(注意:一定要嚴(yán)格洗凈,否則會爛根)。將洗凈的幼苗排好,用清水噴濕,在15-25℃、濕度60%-80%的條件下煉苗24h,也可視情況縮短為l2h。 中國苗木網(wǎng),999miaomu.com (六)移栽煉苗后,將幼苗移栽入由蛭石組成的馴化苗圃中馴化,每天定期給幼苗噴施馴化培養(yǎng)液和清水,大約15-20d后,視幼苗長勢,即可移栽到苗圃中。 三、注意事項(xiàng) 1、配制培養(yǎng)基時(shí),要嚴(yán)格精確地稱取各種化學(xué)試劑。培養(yǎng)基中的蔗糖可用市售白糖來替代,從而降低成本。高壓滅菌條件為120℃,1.5kg/cm2,3Omin。每次接種前都要對接種室進(jìn)行甲醛熏蒸和紫外線滅菌。 2、在培養(yǎng)中,如果出現(xiàn)雜菌污染,應(yīng)立即將該污染試管或三角瓶中的培養(yǎng)物倒掉并將試管或三角瓶洗凈,烘干備用。對于愈傷組織或試管苗長勢良好,僅有局部雜菌污染的試管或三角瓶,也可在無菌條件下,將愈傷組織或試管苗取出,重新放入裝有相應(yīng)培養(yǎng)基的試管或三角瓶中,繼續(xù)培養(yǎng)。 3、煉苗后,也可先將試管苗浸泡在溶解有生根粉的清水中1-2h,再移栽到馴化苗圃中。在馴化過程中,除要注意環(huán)境濕度、溫度和光照外,還要注意防止各種病蟲害的發(fā)生。蘆薈的蟲害主要是紅蜘蛛和蚜蟲,可噴施40%的氧化樂果乳油1200倍液防治。蘆薈的病害主要是黑斑病,可噴施50%多菌靈可濕性粉劑1000倍液防治。 999中國苗木網(wǎng),www.cqhuayin.com
|