常用的滅菌方法可分為物理的和化學的兩類,即：物理方法如干熱（烘燒和灼燒）、濕熱（常壓或高壓蒸煮）、射線處理（紫外線、超聲波、微波）、過濾、清洗和大量無菌水沖洗等措施；化學方法是使用升汞、甲醛、過氧化氫、高錳酸鉀、來蘇水、漂白粉、次氯酸鈉、抗菌素、酒精化學藥品處理.這些方法和藥劑要根據工作中的不同材料不同目的適當選用.
　　培養基在制備后的24小時內完成滅菌工序.高壓滅菌的原理是：在密閉的蒸鍋內,其中的蒸汽不能外溢,壓力不斷上升,使水的沸點不斷提高,從而鍋內溫度也隨之增加.在0.1MPa的壓力下,鍋內溫度達121℃.在此蒸汽溫度下,可以很快殺死各種細菌及其高度耐熱的芽孢.
　　注意完全排除鍋內空氣,使鍋內全部是水蒸氣,滅菌才能徹底.高壓滅菌放氣有幾種不同的做法,但目的都是要排凈空氣,使鍋內均勻升溫,保證滅菌徹底.常用方法是：關閉放氣閥,通電后,待壓力上升到0.05MPa時,打開放氣閥,放出空氣,待壓力表指針歸零后,再關閉放氣閥.
　　關閥再通電后,壓力表上升達到0.1MPa時,開始計時,維持壓力0.1-0.15MPa,20分鐘.
　　到達保壓時間后,即可切斷電源,在壓力到0.5MPa,可緩慢放出蒸汽,應注意不要使壓力降低太快,以致引起激烈的減壓沸騰,使容器中的液體四溢.當壓力降到零后,才能開蓋,取出培養基,擺在平臺上,以待冷凝.不可久不放氣,引起培養基成分變化,以至培養基無法擺斜面.一旦放置過久,由于鍋爐內有負壓,蓋子打不開,只要將放氣閥打開,大氣壓入,內外壓力平衡,蓋子便易打開了. 中國苗木網,999miaomu.com
　　對高壓滅菌后不變質的物品,如無菌水、栽培介質、接種工具,可以延長滅菌時間或提高壓力.而培養基要嚴格遵守保壓時間,既要保壓徹底,又要防止培養基中的成分變質或效力降低,不能隨意延長時間.
　　對于一些布制品,如實驗衣、口罩等也可用高壓滅菌.洗凈晾干后用耐高壓塑料袋裝好,高壓滅菌20-30分鐘.
　　高壓滅菌前后的培養基,其PH值下降0.2-0.3單位.高壓后培養基PH值的變化方向和幅度取決于多種因素.在高壓滅菌前用堿調高PH值至預定值的則相反.培養基中成分單一時和培養基中含有高或較高濃度物質時,高壓滅菌后的PH值變化幅度較大,甚至可大于2個PH值單位.環境PH值的變化大于0.5單位就有可能產生明顯的生理影響.
　　高壓滅菌通常會使培養基中的蔗糖水解為單糖,從而改變培養基的滲透壓.在8%-20%蔗糖范圍內,高壓滅菌后的培養基約升高0.43倍.
　　培養基中的鐵在高壓滅菌時會催化蔗糖水解,可使15%-25%的蔗糖水解為葡萄糖和果糖.培養基值小于5.5,其水解量更多,培養基中添加0.1%活性炭時,高壓下蔗糖水解大大增強,添加1%活性炭,蔗糖水解率可達5%.
　　一、為防止高壓滅菌產生的上訴一些變化可用下列方法：
　　1、經常注意搜集有關高壓滅菌影響培養基成分的資料,以便及時采取有效措施.
　　2、設計培養基配方時盡量采用效果類似的穩定試劑并準確掌握劑量.如避免使用果糖和山梨醇而用甘露醇,以IBA代替IAA,控制活性炭的用量（在0.1%以下）注意PH值對高壓滅菌下培養基中成分的影響等. 999苗木網,www.cqhuayin.com
　　3、配制培養基時應注意成分的適當分組與加入的順序.如將磷、鈣和鐵放在最后加入.
　　4、注意高壓滅菌后培養基PH值的變化及回復動態.如高壓滅菌后的PH值常由5.8升高至6.48.而96小時后又回降至5.8左右.這樣在實驗中就可以根據這一規律加以掌握.
　　二、用于無菌操作的器械采用灼燒滅菌
　　在無菌操作時,把鑷子、剪刀、解剖刀等浸入95%的酒精中,使用之前取出在酒精燈火焰上灼燒滅菌.冷卻后,立即使用.操作中可采用250或500毫升的廣口瓶,放入95%的酒精,以便插入工具.
　　三、玻璃器皿及耐熱用具采用干熱滅菌
　　干熱滅菌是利用烘箱加熱到160-180℃的溫度來殺死微生物.由于在干熱條件下,細菌的營養細胞的抗熱性大為提高,接近芽孢的抗熱水平,通常采用170℃持續90分鐘來滅菌.干熱滅菌的物品要預先洗凈并干燥,工具等要妥為包扎,以免滅菌后取用時重新污染.包扎可用耐高溫的塑料.滅菌時應漸進升溫,達到預定溫度后記錄時間.烘箱內放置的物品的數量不宜過多,以免防礙熱對流和穿透,到指定時間斷電后,待充分冷涼,才能打開烘箱,以免因驟冷而使器皿破裂.干熱滅菌能源消耗太大,浪費時間.
　　四、不耐熱的物質采用過濾滅菌
　　一些生長調節劑,如赤霉素、玉米素、脫落酸和某些微生物是不耐熱的,不能用高壓滅菌處理,通常采用過濾滅菌方法.

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