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春蘭組培技術(shù)

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來源：作者：發(fā)布時間：2013-07-23 17:14

　　20世紀(jì)70年代以來，科研院所已在蘭科植物中采用生物工程技術(shù)養(yǎng)殖蘭花，其效果是傳統(tǒng)方法無法媲美的。筆者嘗試在家庭環(huán)境里開展此項工作，已獲得小批量的春蘭試管苗�，F(xiàn)將具體做法介紹如下，供蘭友們參考。
　�、俳⑿⌒图彝ソM織培養(yǎng)室，自制設(shè)備，簡易土法上馬。眾所周知該項工作要在無菌條件下進行。為此，必須研制密封良好的玻璃接種箱、凈化空氣裝置，采取種種技術(shù)措施，以降低轉(zhuǎn)瓶污染率。用酒精噴霧降塵，成功率上升為92%，這就給篩選最佳培養(yǎng)基配方贏得時間，奠定了良好的基礎(chǔ)。
　�、谠诩彝キh(huán)境里如何才能做到無菌操作呢？筆者著重從以下幾個方面入手：　　所有接觸培養(yǎng)基、能耐高溫的器皿用干熱法（140～150℃）處理，對不耐高溫的用具采用化學(xué)方法滅菌消毒。為解決接種時需在火焰上進行的問題（因箱內(nèi)幾乎無空氣），增添了一只30瓦的電爐，但因溫度高易灼壞外植體，故又加設(shè)了通風(fēng)降溫的設(shè)施。為了減少刀具第二次在環(huán)流中污染，高溫涌毒后安放在一端封閉的筒內(nèi)，同時不斷鼓入凈化的空氣加以冷卻，確保外植體安然無恙地進入營養(yǎng)基瓶中。所有進入箱內(nèi)的物品均需酒精消毒后才放進，凡是帶菌者不許人箱。箱體消毒程序是酒精噴露后紫外線消毒，并定期用甲醛加高錳酸鉀進行熏蒸……

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　�、圻x用適宜的培養(yǎng)基四方。誘導(dǎo)一分化一生根均采用MS基加萘乙酸、細(xì)胞分裂素。但不同的生長階段還需做成分上的調(diào)整，特別是生根時由于蘭生根較其他品種花卉難些，故采用高濃度的NAA浸泡數(shù)秒的做法，效果良好。
　�、芡庵刁w的采取、消毒。外植體以長根的幼苗（未展開葉），隨采隨接種最好，成活率較高（接種時節(jié)以10月至次年2月最好）。外植體消毒，筆者采取0．1升汞加0．l％濃鹽酸多次消毒的辦法，效果更佳。
　�、菖囵B(yǎng)環(huán)境。光照1000～2000勒，10～16小時，培養(yǎng)濕度26℃土2℃，空氣濕度應(yīng)控制在較低的水平（70％～80％），否則極易再一次污染。
　　幾點體會： ①在家庭中建立小型組培宜是可行的，它的投資少（可充分利用家中的條件）。筆者從籌備到進行試驗只花去數(shù)百元，該試驗設(shè)備也可用于開展其他品種（如木本、藥用植物等）的研究工作。 ②無菌操作必須從思想上重視，操作上謹(jǐn)慎才是。否則損兵折將，后果不堪設(shè)想。 ③目前因手邊無實體顯微鏡，只能做以芽生芽的試驗。采取一些措施如分期切制樣品、液體加旋轉(zhuǎn)床的方案，是取得大批量類原球莖的一種途徑，其養(yǎng)殖速度也會有所突破。

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