苗木組織培養(yǎng)中各種用于接種培養(yǎng)的材料 稱為外植體。包括苗木體的各種器官、組織、細(xì) 胞和原生質(zhì)體等。組織培養(yǎng)所用的材料非常廣 泛，如鐵樹可采取根、莖、葉、花、芽和種子的子葉，有時 也利用花粉粒和花藥，其中根尖不易滅菌，一般 很少采用。
　　對于木本花卉來說，闊葉樹可在一二年生的
　　枝條上采集，針葉樹種多采種子內(nèi)的子葉或胚
　　軸.草本苗木多采集莖尖。
　　在快速繁殖中，最常用的培養(yǎng)材料是莖尖， 通常切塊在0. 5 001左右，如果為培養(yǎng)無病毒苗 而采用的培養(yǎng)材料通常僅取莖尖的分生組織部 分，其長度在0.111皿以下。
　　培養(yǎng)材料的滅菌
　　取來的材料雖經(jīng)選擇，外部總還有不少雜 菌，因此,接種前應(yīng)進(jìn)行表面滅菌。
　�、傧葘⒉牧嫌昧魉疀_洗干凈，最后一遍用 蒸餾水沖洗，再用無菌紗布或吸水紙將材料上的 水分吸干，并用消毒刀片切成小塊。
　　②在無菌環(huán)境中將材料放人70《酒精中浸 泡30?60 So
　�、墼賹⒉牧弦迫似�白粉的飽和液或0.01% 升汞水中消莓5?10 min.
　�、苋〕龊笥脽o菌水沖洗三四次。
　　將已滅菡的材料，用無菌刀、剪、鑷等，在無
　　菌的環(huán)境下，剝?nèi)パ康镊[片、嫩枝的外皮和種皮 胚乳等，葉片則不需剝皮。然后切成0.2? 苗木網(wǎng),999miaomu.com
　　5 0巾厚的小片，這就是外植體。在操作中嚴(yán) 禁用手觸動材料。
　　4. 4. 2 接種
　　接種是指把經(jīng)過表面滅菌后的苗木材料切 碎或分離出器官、組織、細(xì)胞，轉(zhuǎn)放到無菌培養(yǎng) 基上的全部操作過程。整個過程均須無菌 操作。
　�、俳臃N前先把接種室紫外燈打開，照射滅 菌20?30 !^⑴或提前0. 5?1 d用髙錳酸鉀和 甲醛混合液熏蒸。接種臺要提前開啟。
　�、诓僮魅藛T進(jìn)人接種室前需用肥皂水洗手 滅菌，換上經(jīng)過消毒滅菌的白色工作服和拖鞋， 戴上工作帽和口罩。
　�、圻M(jìn)人接種室后用70《的酒精棉球擦拭雙 手、超凈工作臺和需放上工作.臺的所有器具，防 止交叉污染�！�
　　④點(diǎn)燃酒精燈，將接種鉤、剪刀、鑷子放人 不銹鋼盤或瓷盤內(nèi)燒灼，冷卻后備用。接種鉤、 剪刀、鑷子等不使用時浸泡在95‘冗的酒精中,用 時在火焰上滅菌，待冷卻后使用。每次使用前均 需進(jìn)行用具滅菌。
　�、輰⑼庵搀w放入經(jīng)燒灼滅菌的不銹鋼盤或 瓷盤內(nèi)處理。如外植體為莖段的，將莖段上的葉 柄和莖的上下端剪掉一小節(jié);培養(yǎng)脫毒苗的，在 雙筒解剖鏡下剝離切取大小0. 2?0.‘3 mm時莖 尖分生組織。
　　⑥燒灼瓶口和塞子，將培養(yǎng)瓶傾斜拿穩(wěn)，打 開塞子，用鑷子將接種材料送人瓶內(nèi)，用接種鉤 將材料壓人培養(yǎng)基中，燒灼瓶口和塞子,并上塞。 此過程中要注意避免細(xì)菌污染。-

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