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蘭花的組織培養

    組織培養是先進的無性繁殖方法。取用植物器官或組織的一小部分，脫離母體而加以培養，經過誘導和分化，使它再生成獨立的新植株。也稱為外植體培養。

    早在1902年，德國植物學家哈巴蘭特（Haberlandt）預言：“植物細胞具有全能性，每個細胞都像胚胎細胞那樣，可以經過體外培養成為一個完整的植株。”在這個假說指引下，法國科學家戈第勒（Gautheret）和諾貝庫特（Nobecourt）用小塊的胡蘿卜根，于1938年成功地在試管中用培養基培養出愈傷組織。1939年，美國科學家懷特（White）用煙草莖段形成層進行組織培養和繼代培養，也獲得成功。他們的工作為植物細胞和組織培養技術的發展奠定了基礎。1949年，美國斯庫格（Skooog)等又從愈傷組織中分化出幼苗來，培養出了真正的試管植物。從此之后，組織培養的技術，不斷創新改進，在實驗上和應用上都獲得日新月異的進展。

    蘭花的莖尖組織培養，最早是法國人葛雷爾（Morel）在1960年獲得成功的。他利用莖尖培養的目的是想除去蘭屬植物上的病毒，他得到了無病毒的幼苗。他發現蘭屬莖尖培養，可逐漸增大而形成類原球莖體，與蘭花胚胎正常發育相似、經過分割，重復培養可以大量增殖、按照理論計算，l個外植體在1年之內可產生400萬株苗之多。從此，組織培養技術被應用于蘭花的繁殖，刀多年來形成了蘭花的工廠化、商品化的生產。 999苗木網,999miaomu.com

    目前，蘭花的各個部位，各個器官，即根、莖、葉、芽、花序、幼胚等都可以作為外植體進行培養。

    組織培養要有必要的設備和比較高的技術措施。首先要有培養室、無菌接種室及各種培養用具、用品等。在培養時要先配制培養基，剝取外植體，然后消毒、接種、轉移，最后試管苗移植等，都需要比較復雜和細致的技術。現將組織培養的方法簡介如下。

    （一）培養基的配制

    培養基是用各種不同成分和劑量的元素，加上各種維生素、激素等制成。蘭花種類不同，培養基的成分也有所不同。大多數的培養基是用固體或半固體的，也有用液體培養的，在液體中培養則需特殊的通氣方法，如常用的離心機或轉動機，不停地將培養基轉動。

    培養基須包括礦物質、糖、維生素及生長激素。在實際中用得最多的是MS培養基，或在此基礎上加添少數激素。  MS培養基（ Murashige and Skoog basic medium）的成分如下：

    成分                                       用量（mg）

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    NH4NO3硝酸銨                                   400
    Ca（NO3）2•4H2O硝酸鈣                          144
    KNO3硝酸鉀                                      80
    KH2PO4磷酸二氫鉀                               125
    MgSO4 •7H2O硫酸鎂                               72

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    KCL氯化鉀                                       65
    NaFe—EDTA螫合鐵                                25
    H3BO3硼酸                                        16
    MnSO4 •4H2O硫酸錳                               65 999中國苗木網,www.cqhuayin.com
    ZnSO4• 7H2O硫酸鋅                               27
    KI碘化鉀                                        0.75
    IAA吲跺乙酸                                       2
    Kinetin激動素                                0.04—0.2

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    Thiamin維生素B1                                                    0.1
    Nicotinicacid煙酸                                   0.5
    Pyridoxine維生素B6                                 0.5
    Glycine甘氯酸                                       2 中國苗木網,999miaomu.com
    Myo—inositol肌醇                                  100
    Casein—hydrolysate水解酪蛋白                      1000
    Sugar蔗糖                                         2%
    瓊脂（洋菜）                                       l％
    蒸餾水                                         1000ml 中國苗木網,www.cqhuayin.com
    PH值為5.0-6.0

    配制培養基要在實驗室內進行，各種用具、玻璃瓶或試管，都要嚴格消毒殺菌。最后配成的培養液注入玻璃瓶或試管內，再進行消毒，冷卻后接入蘭花外植體。接種工作應在無菌接種室或超凈工作臺上完成。

   （二）接種方法

    1采取莖尖

    蘭屬植物的組織培養以莖尖為最常用的材料。莖尖是分生組織最為活躍的生長點。選擇健壯植株，將外層的葉和鞘葉剝去，把整個莖尖切下，浸入 2.5％的漂白粉溶液或7％的次氯酸鈉溶液中15—20分鐘。然后取出用蒸餾水沖洗5—6次，將消毒液沖洗十凈。在顯微鏡或擴大鏡下將莖尖的生長點挑出，并即刻接種到玻璃管培養基上。

    2. 培養原球體

    生長點一般經過4-6周的培養，產生出小而圓的原球體。將原球體取出，重新分切，l分為4，再入培養基內培養，經l—2個月又可長出原球體。同樣，再行分割；重新培養。在幾個月之內，就會獲得大量的原球體。

    3分化培養

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    把切割的原球體放在液體培養基中，放在旋轉培養床上進行旋轉培養。當其小塊組織稍為長大后，轉接在分化的培養基上，讓它分化根和芽。

    4 . 試管苗移植

    當原球體組織分化根和芽，逐漸長大之后，就成為幼小植株。經一段培養，生長到一定程度就應該從玻璃瓶或試管中取出，移植到土壤或基質中了。移出試管后，用自來水將根上的培養基輕輕沖洗干凈。栽培基質一般用水苔或蛭石。栽植后移入溫室內培養。

    在組織培養中要經過兩個關：第一個關是分化培養基的生長激素和劑量，能否分化根和芽，完全取決于它。用什么激素和什么劑量，每種蘭花都不一樣，要經過摸索試驗才能掌握。可以設計幾種配方，進行對比實驗來確定。第二個關是試管苗移出瓶后，往往不適應外界環境而大批死亡。要創造良好條件，在精心管理之下，才能獲得良好結果。

（記者佚名）

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