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幾種珍貴荷花品種組織培養技術 |
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| 來源：未知 作者：admin 發布時間：2013-08-02 00:13 |
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荷花(Ｎｅｌｕｍｂｏｎｕｃｉｆｅｒａ)為睡蓮科蓮屬的宿根水生花卉,是中國的傳統名花和重要的經濟植物。我國荷花品種資源十分豐富,由于花蓮多為自然雜交或人工雜交品種,播種繁殖難以保持原品種性狀,再者花蓮中的許多品種常因雌雄蕊瓣化而不易結實,因此,資源圃荷花品種傳統的繁殖及保存方法主要采用分藕和大面積缸栽或池植[1]。但是,荷花的分藕繁殖系數較低,這個問題現已成為限制荷花種植業發展的主要障礙[2,3]。此外,有些品種因生長勢弱,品種保存十分困難。為了能充分利用品種資源,及時為商業化生產提供大量優良種苗,同時又能為珍貴品種的保存開辟新途徑,我們對一些珍貴荷花品種進行了組織培養試驗,篩選出較為合適的培養基,并獲得了大量荷花組培苗,現將試驗結果報道如下。 999中國苗木網,www.cqhuayin.com 1 3 培養基 試驗中ＭＳ培養基為基本培養基,含瓊脂5ｇ Ｌ,ｐＨ值5 8。在ＭＳ培養基中分別加入赤霉素ＧＡ0 2ｍｇ Ｌ和不同濃度的細胞分裂素ＢＡ(0 2～0 8ｍｇ Ｌ),培養一段時間后,觀察不同激素水平對誘芽的影響。待幼葉長出后轉入增殖培養基,在ＭＳ培養基中添加不同濃度的ＢＡ(0 2～1 0ｍｇ Ｌ)、ＧＡ(0～0 5ｍｇ Ｌ)和生長素ＩＢＡ(0～0 5ｍｇ Ｌ),觀察不同激素水平對增殖的影響。在相同激素水平的情況下,用固體(加瓊脂5ｇ Ｌ)和液體2種培養基進行增殖培養。若干天后,觀察兩者的增殖結果。將經增殖培養后帶有莖段的小苗轉入添加ＩＢＡ(0～1 8ｍｇ Ｌ)或生長素ＮＡＡ(0～1 4ｍｇ Ｌ)的生根培養基中,觀察不同激素對生根的影響。培養室恒溫為25℃,光照強度為2000ｌｘ,每天光照14ｈ。 1 4 移栽煉苗 將試管苗分別栽入營養液(Ｋ∶Ｎ∶Ｐ∶Ｍｇ∶Ｃａ=22∶13∶1∶1∶3)、黃沙、西湖淤泥(西湖淤泥∶泥炭∶基肥=8∶2∶2)等基質中,黃沙和西湖淤泥經高溫滅菌,使用時加營養液呈稀糊狀,調查試管苗的成活率。 2 結果與分析 2 1 不同激素水平對誘芽率的影響 經20ｄ培養后結果(表1)可見,各參試荷花品種芽的誘導率均以采用ＭＳ+ＢＡ0 4(ＢＡ0 4表示加入ＢＡ0 4ｍｇ Ｌ,下同)+ＧＡ0 2誘導培養基時最高。5個品種中,貴妃誘導率較低,僅10%～55%。而另4個品種,采用ＭＳ+ＢＡ0 4+ＧＡ0 2誘導培養基時,誘導率均在80%～90%。ＭＳ+ＢＡ0 2+ＧＡ0 2處理的誘導率雖然也比較高,但芽細小,葉柄細長,生長勢弱。ＭＳ+ＢＡ0 8+ＧＡ0 2誘導培養基發出的芽比較粗壯,葉柄短,葉片卷曲、較厚,但誘導率較低,大約14ｄ以后有幼葉長出。試驗結果可見,ＢＡ濃度高于0 4ｍｇ Ｌ,達到0 8ｍｇ Ｌ時,荷花的芽誘導受到了抑制,故誘導培養基以ＭＳ+ＢＡ0 4+ＧＡ0 2為好。 999苗木網,www.cqhuayin.com 2 2 不同激素水平對增殖的影響 將已發芽并帶幼葉的小苗轉入不同激素、不同濃度的培養基中培養25ｄ后,發現廈門碗蓮、白玉、佛手觀音和佛座等4個品種的大多數小苗能發出1～3個新芽,部分小苗還能長出莖段,貴妃芽的增殖頻率、芽的平均增殖系數和發出莖段的頻率明顯低于其它4個品種(表2,3,4)。 當在添加了ＢＡ0 8ｍｇ Ｌ的ＭＳ培養基中再添加ＧＡ0 5ｍｇ Ｌ或ＩＢＡ0 5ｍｇ Ｌ時,除貴妃外,其它4個品種的芽增殖頻率均在70%～90%。但該2組處理的莖段增殖頻率相差很大,添加ＧＡ0 5ｍｇ Ｌ的處理除貴妃外,均在55%以上;而添加ＩＢＡ0 5ｍｇ Ｌ的處理則都在0～10%。由此可見,ＢＡ無論和ＧＡ合用,還是和ＩＢＡ合用,芽的增殖頻率相差不多,但ＧＡ可明顯促進莖段的發生。試驗結果還可以看出,隨著ＢＡ濃度由低到高,芽的增殖頻率也呈現由低到高的趨勢。至ＢＡ0 8ｍｇ Ｌ時增殖率最高,而當ＢＡ濃度達到1 0ｍｇ Ｌ時,荷花莖段的發生則受到了抑制。從以上結果可見,荷花的增殖培養基以ＭＳ+ＢＡ0 8+ＧＡ0 5較合適。 2 3 固體和液體培養基對增殖的影響 用ＭＳ+ＢＡ0 8+ＧＡ0 5固體和液體2種培養基同時繼代10ｄ,都能發出新芽。繼代25ｄ后,兩者的增殖頻率差別不大(表5),液體培養基的平均增殖系數略低,但植株健壯,且不干枯;而固體培養基內會出現葉片及葉柄干枯的情況,且植株細弱。在實際操作中,兩者交替使用,可達到好的效果。 苗木網,www.cqhuayin.com 2 4 不同激素水平對生根的影響 增殖培養25～30ｄ,將帶有莖段的小苗轉入生根培養基培養20ｄ后可見,不同激素水平的對荷花根的促生作用有很大區別(表6),個別小苗在第7ｄ有根長出,多數在20ｄ后長根。當ＩＢＡ濃度分別為0 6ｍｇ Ｌ、1 0ｍｇ Ｌ和1 4ｍｇ Ｌ時,生根率呈現從低到高的趨勢;當ＩＢＡ濃度達到1 8ｍｇ Ｌ時,生根率下降。試驗結果可見,添加ＮＡＡ各處理的生根率都很小。ＬＳＤ法測定結果顯示,試驗處理中,以ＭＳ+ＩＢＡ1 4的生根率最高,均在55%以上,最高可達83 3%。 2 5 試管苗的移栽 在移栽試驗中我們發現,將已長根的小苗從瓶中輕輕移出后,須在自來水中放置2～3ｄ(每天換水),再植入備好的基質中,小苗栽植深度以2ｃｍ為宜,移栽14ｄ以后長出新根,30ｄ后發出新芽,此時,可逐漸提高水位。在營養液、黃沙及西湖淤泥等3種移栽基質中,黃沙和營養液荷花試管苗成活率分別為55 6%和45 5%,以西湖淤泥的成活率最高,達到72 7%。 3 小結與討論 誘芽培養基以選用ＭＳ+ＢＡ0 4ｍｇ Ｌ+ＧＡ0 2ｍｇ Ｌ最為理想,既能獲得較高的誘導率,又能保證荷花生長健壯。增殖培養時,在ＭＳ培養基中添加ＢＡ0 8ｍｇ Ｌ或ＢＡ1 0ｍｇ Ｌ與ＧＡ配合使用,能獲得較高的增殖率,但連續繼代2次以上,會出現畸型苗,如果和ＢＡ0 4ｍｇ Ｌ+ＧＡ0 2ｍｇ Ｌ交替使用,能最大程度地避免這種情況發生。與此同時,還應將固體培養基和液體培養基交替使用,這樣才能得到多而健壯的小苗。在生根培養中,ＩＢＡ的促生根作用明顯優于ＮＡＡ。當2種激素的濃度同為1 4ｍｇ Ｌ時,ＩＢＡ最高生根率能達到83 3%,而ＮＡＡ只有13 3%,所以,荷花生根培養用ＩＢＡ效果較好。廈門碗蓮、白玉、佛手觀音和佛座等4個品種,在整個離體培養過程中生長情況區別不大,只有貴妃的誘芽率、增殖率和生根率都較低,這說明不同品種材料的異質性,應考慮調整培養基的激素水平[5]。試管苗出瓶后,先要在自來水中放置2～3ｄ洗凈培養基質,再移入經消毒過的西湖淤泥,成活率可達72 7%。 999中國苗木網,www.cqhuayin.com （記者 中華園林網） 999中國苗木網,www.cqhuayin.com |
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